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曠場(open field test)分析系統(tǒng)是觀察研究實(shí)驗(yàn)動(dòng)物神經(jīng)精神變化、進(jìn)入開闊環(huán)境后的各種行為,例如動(dòng)物對(duì)新開闊環(huán)境的恐懼而主要在周邊區(qū)域活動(dòng),在中央?yún)^(qū)域活動(dòng)較少,但動(dòng)物的探究特性又促使其產(chǎn)生在中央?yún)^(qū)域活動(dòng)的動(dòng)機(jī),也可觀察由此而產(chǎn)生的焦慮心理。中樞興奮藥物可以明顯增加自主的活動(dòng)而減少探究行為,一定劑量的抗精神病藥物可以減少探究行為而不影響自主活動(dòng)。
曠場實(shí)驗(yàn)(open field test)又稱敞箱實(shí)驗(yàn),是評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在新異環(huán)境中自主行為、探究行為與緊張度的一種方法。以實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在新奇環(huán)境之中某些行為的發(fā)生頻率和持續(xù)時(shí)間等,反應(yīng)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在陌生環(huán)境中的自主行為與探究行為,以尿便次數(shù)反應(yīng)其緊張度。
使用VisuTrack動(dòng)物行為學(xué)分析軟件,需要先設(shè)置好動(dòng)物的識(shí)別區(qū)域,通過軟件自身強(qiáng)大的AI智能識(shí)別算法,可以自動(dòng)識(shí)別動(dòng)物的頭部、重心和尾巴,計(jì)算動(dòng)物在曠場實(shí)驗(yàn)箱中的活動(dòng)路程、站立次數(shù)、跨格等級(jí)、區(qū)域偏好等行為。
曠場實(shí)驗(yàn)操作簡單,在用于抑郁行為學(xué)評(píng)價(jià)中,無適期階段,操作步驟如下 :
(1) 實(shí)驗(yàn)前,動(dòng)物應(yīng)適應(yīng)檢測(cè)環(huán)境 30 ~ 60 min;
(2)實(shí)驗(yàn)人員在VisuTrack軟件中預(yù)先設(shè)置好相應(yīng)的參數(shù),記錄好動(dòng)物的編號(hào)、日期、狀態(tài)信息;
(3) 動(dòng)物放入測(cè)試箱后,即開始檢測(cè),檢測(cè)時(shí)間宜為5~10 min;
(4) 每次實(shí)驗(yàn)時(shí)應(yīng)從同一位置同一方向?qū)?dòng)物放入測(cè)試箱中央。
(1) 總路程(total distance):動(dòng)物在實(shí)驗(yàn)記錄時(shí)間內(nèi)產(chǎn)生的物理位移累積;
(2) 速度(speed):動(dòng)物在單位時(shí)間產(chǎn)生的物理位移。 5min內(nèi)正常動(dòng)物總路程多為1000~2500cm,速度為3~8cm/ s。 動(dòng)物出現(xiàn)抑郁行為時(shí),速度減少;
(3) 運(yùn)動(dòng)總時(shí)間(total move time):動(dòng)物在實(shí)驗(yàn)記錄時(shí)間內(nèi)的產(chǎn)生物理位 移時(shí)所需的時(shí)間累積。 正常動(dòng)物運(yùn)動(dòng)時(shí)間多大于檢測(cè)時(shí)間的30%;抑郁行為判斷標(biāo)準(zhǔn):與對(duì)照組相比有顯著性減低(P<0. 05);
(4) 站立次數(shù)(number of standing):動(dòng)物在實(shí)驗(yàn)記錄時(shí)間內(nèi)的站立總次數(shù)。10min檢測(cè)時(shí)間,正常大鼠站立次數(shù) 20 ~ 50 次。10min檢測(cè)時(shí)間,空白對(duì)照組小鼠站立次數(shù) 60~130次;抑郁行為判斷標(biāo)準(zhǔn):與對(duì)照組相比顯著減低 (P < 0. 05)。
(5)糞便數(shù)量反應(yīng)大鼠的焦慮情況。(VisuTrack軟件是目前市面上一款能夠自動(dòng)檢測(cè)曠場實(shí)驗(yàn)箱中糞便數(shù)量的動(dòng)物行為學(xué)分析軟件)
1、實(shí)驗(yàn)前需要對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物每天撫摸1-2min以減少非特異性應(yīng)激刺激對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物檢測(cè)中的影響。
2、實(shí)驗(yàn)過程中需要弱光照明,觀察者盡量與測(cè)試動(dòng)物分隔。
3、實(shí)驗(yàn)過程中需要環(huán)境安靜。
4、進(jìn)行曠場檢測(cè)時(shí),需要對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物進(jìn)行篩選,有些實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在正常情況下水平方向或垂直方向的活動(dòng)情況顯著低于同批動(dòng)物平均水平,則需要將這些動(dòng)物預(yù)先剔除。
5、實(shí)驗(yàn)前需要提前至少3小時(shí)將動(dòng)物帶入實(shí)驗(yàn)室,降低動(dòng)物對(duì)新環(huán)境的不安情緒。
6、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的性別、周齡盡量保持一致,因?yàn)榧に厮娇赡軙?huì)影響動(dòng)物行為。
7、注意實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的晝夜節(jié)律,在24h內(nèi)有其活動(dòng)周期,盡量選擇同一時(shí)間段開展實(shí)驗(yàn)。
8、OFT實(shí)驗(yàn)對(duì)動(dòng)物各方面影響較小,而其他行為學(xué)實(shí)驗(yàn)(如強(qiáng)迫游泳、水迷宮、懸尾實(shí)驗(yàn))影響較大,因此同一批動(dòng)物進(jìn)行不同行為學(xué)測(cè)試時(shí),應(yīng)先進(jìn)行OFT實(shí)驗(yàn)。
9、實(shí)驗(yàn)應(yīng)在隔音,光強(qiáng)度和溫、濕度適宜且保持一致的行為實(shí)驗(yàn)室內(nèi)進(jìn)行。
10、兩次實(shí)驗(yàn)之間清洗實(shí)驗(yàn)設(shè)備,以免上次動(dòng)物余留信息影響下次實(shí)驗(yàn)結(jié)果。